Trypsine
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La trypsine est une enzyme digestive du suc pancréatique qui a pour but de digérer les protéines. Elle est synthétisée sous forme de trypsinogène (proenzyme inactive) puis stockée dans les vésicules enzymatiques des cellules acineuses, d'où elle est excrétée au moment de la digestion. L'activation du trypsinogène en trypsine est le résultat de l'hydrolyse d'un propeptide sous l'action de l'entérokinase ou par un effet d'autoactivation de la trypsine elle-même.
La trypsine est une endoprotéase qui hydrolyse les liaisons peptidiques dans lesquelles un acide aminé basique (Lysine (Lys), Arginine (Arg)) engage sa fonction acide. Elle coupe en C-terminal de ces acides aminés. En d'autres mots, elle transforme les chaînes polypeptidiques en chaînes protéiques plus courtes. La trypsine se retrouve chez la plupart des animaux. cette enzyme est très utilisée pour des approches de recherche en protéomique, spécialement pour la caractérisation et séquençage de protéines. Elle est également utilisée en Imagerie par spectrométrie de masse sur les tissus fixés et paraffinés (FFPE).
Stable à pH acide (<7), elle est inactivée et digérée en quelques heures à pH neutre (=7) dans l'intestin. La cholecystokinine-pancréozymine active la sécrétion des enzymes (donc de la trypsine) dans le suc pancréatique.
La trypsine est utilisée en culture cellulaire pour détacher les cellules cultivées sur boîte de Pétri (car les cellules sont très étalées sur la boîte). L'action de la trypsine est inhibée par un ajout en excès du milieu de culture ; les cellules se retrouvent alors en solution. Ce traitement est quotidiennement utilisé en biologie cellulaire pour :
- amplifier les cultures cellulaires (en passant à une boîte de Pétri plus grande ou en multipliant les boîtes!)
- compter les cellules via un compteur de cellules (FACS, pour "Fully Automatized Cell Sorter")
La trypsine est également utilisée en immuno-hématologie pour la recherche des anticorps irréguliers ou encore lors de l'établissement d'un caryotype : elle permet, en collaboration avec le Giesma, l'apparition de bandes G sur l'ADN et donc l'identification précise des chromosomes. Une anomalie chromosomique peut être ainsi détectée.
La trypsine participe par exemple à l'activation d'autres enzymes comme l'alpha-chymotrypsine par coupure hydrolytique de la chaîne polypeptidique du chymotrypsinogène.
cette enzyme sert également lors de la 2éme semaine du developpement embryonnaire humain. elle est sécrétée par le trophoblaste afin de "digérer" la zone pellucide entourant le blastocyste. Ce phénoméne s'appelle l'éclosion.
