Tampon phosphate salin
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Le tampon phosphate salin (souvent abrégé « PBS », venant de l'anglais phosphate buffered saline) est une solution tampon couramment utilisé en biochimie. Il s'agit d'un soluté physiologique contenant du chlorure de sodium, du phosphate trisodique et du phosphate de potassium. En général, la concentration de ces sels est celle du corps humain (isotonicité). Ce tampon sert surtout à rincer les cellules lorsqu'il faut enlever toute trace de milieu avant de les traiter. Il est prévu pour un usage sur les cellules maintenues hors de l'incubateur à CO2 n'est pas conçu pour des incubations à long terme.
[modifier] Préparation
Pour préparer 1000mL de PBS :
| Concentration et produits | Quantité |
|---|---|
| 0,17M NaCl | 9,93 g/L |
| 3,3mM KCl | 0,25g/L |
| 10mM Na2HPO4 | 1,43g/L |
| 1,8mM KH2PO4 | 0,25g/L |
Pour certains usages, on ajoute à ce tampon du calcium (CaCl2) ou du magnésium (MgCl2).
[modifier] Applications
Le tampon phosphate a de nombreuses applications de part son isotonicité et sa non-toxicité. Il peut être utilisé comme solvant, et comme solution de rinçage. Comme il structure l'eau autour des biomolécules (protéines, protéines enzymatiques, etc.) immobilisées sur des surfaces solides, le tampon phosphate peut aussi être utilisé comme diluant pour assurer le stockage à sec de celles-ci. Ces couches minces d'eau permettent d'empêcher la dénaturation des biomolécules, ou des changements conformationnels. Il est possible d'utiliser un tampon carbonate pour assurer la même fonction, mais ceux-ci sont moins efficaces. Le tampon phosphate peut également servir de spectre de référence en éllipsométrie lors de la mesure de l'adsorption d'une protéine.
Des additifs permettent d'étendre son champ d'application. Ainsi, un mélange d'EDTA et de PBS permet de détacher des cellules amassées. En revanche, son utilisation avec des métaux divalents peut causer un précipité. Pour ce genre d'usage, un tampon de Good est souvent plus adapté.
