Test VIH
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Un test VIH (par anglicisme, il est parfois appelé test HIV) a pour but de détecter la présence dans le corps humain du virus de l'immunodéficience humaine (VIH) responsable du syndrome d'immunodéficience acquise (Sida).
Il existe plusieurs types de tests VIH (comme ELISA et western blot qui sont des techniques de tests non spécifiques au VIH), les principaux utilisent la détection d'anticorps et/ou d'antigènes (protéines) et/ou encore d'une séquence d'ARN du VIH. En raison des limites inhérentes à tout test biologique, il est nécessaire de réaliser plusieurs tests (successivement un test sensible puis un spécifique) avant que le patient soit déclaré séropositif au VIH.
Les test VIH sont réalisés pour diverses raisons, comme lors de la suspicion d'infection ou bien en cas de prévention lorsque l'on travaille dans un milieu à risque comme l'hôpital. En vue de lutter contre la transmission par des personnes n'étant pas au courant de leur statut sérologique, des pays ont mis en place des possibilités de tests anonymes et gratuits.
Sommaire |
[modifier] Terminologie
[modifier] Les tests d'anticorps
Les tests d'anticorps, bons marchés et très précis, sont conçus spécialement pour les analyses VIH de routine chez les adultes. Si une personne ne présente pas de risque vraisemblable d'avoir été contaminée, ces tests ne sont pas nécessaires.
[modifier] Termes de statistique nécessaire à l'interprétation
[modifier] Fenêtre sérologique
Les tests d'anticorps donnent des résultats d'erreur de deuxième espèce au cours de la période fenêtre sérologique, qui va de trois semaines à six mois, période allant du moment de la contamination par le VIH jusqu'à celui où le système immunitaire commence à produire un nombre détectable d'anticorps. Cela signifie que les tests d'anticorps sont inefficaces au cours de cette période. Chez la grande majorité des gens, les anticorps détectables apparaissent après trois mois. Une période fenêtre de six mois est extrêmement rare, grâce aux tests d'anticorps les plus récents. Bien que le VIH demeure indétectable au cours de cette période fenêtre, une personne infectée peut très bien transmettre le virus. Des médicaments antirétroviraux administrés pendant cette période fenêtre peuvent ralentir la formation d'anticorps, et allonger la période fenêtre au-delà de douze mois[1].
[modifier] Coinfection avec une hépatite virale
En cas de contamination simultanée au VIH ET à un virus de l'hépatite (A, B ou C), par exemple avec du sang de malade(s) en milieu hospitalier ou par un échange de seringue avec une personne droguée doublement infectée, on peut observer un retard de séroconversion très importantréf. à confirmer : [2],[3], et dans ces cas, les autorités sanitaires recommandent de poursuivre les tests d'anticorps jusqu'au 12ème mois — VIH et VH-A/B/C — et ce en fonction de la sérologie du sujet source qui doit pouvoir être connue. Généralement, durant cette période fenêtre rallongée, seule une PCR VIH et VH-A/B/C peut révéler la présence des virus avant l'apparition des anticorps. Mais ces cas particuliers ne concernent quasiment que le personnel soignant travaillant en laboratoire de Biologie médicaleréf. à confirmer : [4],[5],[6] où le risque d'être exposé à plus de un virus en même temps est important.
[modifier] Enjeux des tests et contexte de leur réalisation
La plupart de ces tests biologiques sont réalisés dans le cadre de dépistage du virus du Sida (VIH). D'autres le sont dans le cadre du suivi infectieux.
- Cette section décrit l'utilisation des différents tests, leur description détaillée est donnée dans la section suivant Techniques. Le sigle ° renvoie à leur description dans cette section.
[modifier] Dépistage et diagnostic
Le diagnostic sérologique est un acte médical réalisé, en France, par un médecin.
Le diagnostic visant à déterminer le statut sérologique au VIH est réalisé en deux étapes :
- le dépistage proprement dit, généralement une détection d'anticorps.
- la confirmation, c'est à dire que les anticorps détectés sont bien liés à une infection par le VIH.
[modifier] Le dépistage
La première étape se base sur la détection d'anticorps produits en réponse à une infection par le VIH, ce sont les anticorps anti-VIH. Cette production d'anticorps peut être détectée avec les moyens actuels en moyenne 22 jours après la contamination [7]. Durant cette période, appelée fenêtre sérologique, le patient est parfaitement infectieux, ce qui pose des problèmes évidents de santé publique. Une fois la fenêtre sérologique passée son statut sérologique peut être établi.
Le dépistage emploie la méthode ELISA°, qui utilise la réaction anticorps-antigène pour détecter la présence des anticorps anti-VIH. Pour éviter les faux négatifs et ainsi ne pas passer à côté d'un cas de séropositivité, le test doit avoir une sensibilité optimale, un mélange d'antigènes viraux est alors utilisé, permettant la détection des anticorps anti-VIH-1 et anti-VIH-2 (on parle alors d'ELISA mixte). Dans le cadre de dons du sang, le but étant d'éliminer toute poche infectée, un test est suffisant (valeur prédictive négative optimale). Dans le cadre d'un diagnostic médical pour un patient, en France, on réalise au moins deux tests de marque et de fabrication différentes de type ELISA sur le même échantillon sanguin et éventuellement trois en fonction du risque d'exposition du patient évalué par le médecin. En effet quand la prévalence de la séropositivité dans une population est faible, la probabilité pour un test positif d'être un faux positif augmente, en application du théorème de Bayes. Dans tous les cas un test de confirmation différent doit être fait mais l'utilisation d'un double test permet d'éviter des faux positifs en augmentant la valeur prédictive positive dès la première étape.
Lorsque seul l'un des test ressort positif, les tests sont contradictoires et le médecin peut décider de refaire des tests sur un nouvel échantillon sanguin ou de réaliser directement un test de confirmation. Les tests peuvent par ailleurs ressortir comme indéterminés, dans ce cas il est conseillé d'attendre quelque semaines ou un mois avant de procéder à de nouveaux tests. Dans ce dernier cas, si les tests ne sont pas tout simplement erronés, ils peuvent révéler d'un état de séroconversion.
Les tests de dépistage sont significatifs après un délai d'incubation qui varie selon les personnes de quelques semaines à plusieurs mois. Les laboratoires considèrent les tests fiables dès 4 semaines après le risque à 99,8%. Les tests seraient à 100% fiables dès les 6 semaines après la prise de risque. Pendant cette période appelée fenêtre sérologique, le sujet est infectieux mais les tests sérologiques sont négatifs. Il existe cependant un test dit de l'antigène P24 qui permet un diagnostic précoce, la détection de l'antigène p 24 peut être intéressante car elle est positive pendant la phase sérologiquement muette.
Par ailleurs les tests de dépistage peuvent ressortir faussement positifs dans certains cas : après une vaccination anti-grippale, pour les personne atteintes de lupus (maladie auto-immune).
[modifier] Antigénie p24 et méthode combinée
L'antigénie p24° peut être utilisée lorsque la séroconversion n'a pas encore eu complètement lieu. Le test devient négatif une fois la séroconversion effectuée, cela explique donc l'utilisation de la procédure précédemment décrite comme un standard. En cas de doute et de prise de risque trop récente on préfère utiliser la méthode dite combinée qui utilise l'antigénie p24 et la détection d'anticorps (Elisa). Cette méthode est intéressante au tout début de la contamination, car elle réduit la fenêtre sérologique jusqu’à deux à cinq jours, tout en assurant la prise en compte des personnes totalement séroconverties.
[modifier] Le test de confirmation
Les tests de dépistage lorsqu'ils sont positifs doivent être confirmés par un test dit de confirmation (en pratique western blot°). Les tests de dépistage sont choisis pour leur sensibilité dans le but d'éviter tous cas faussement négatifs et peuvent réagir dans de rares cas à des anticorps non-spécifiques, il faut donc réaliser un test ayant une bonne spécificité qui vise à savoir si les anticorps détectés sont bien liés à une infection par le VIH-1. C'est la méthode western blot (WB) qui est généralement utilisée. Méthode spécifique oblige, les antigènes viraux sont séparés et doivent détecter au moins deux des trois glycoprotéines virales (gp160, gp120 ou gp41) ou la protéine p24 et la glycoprotéine gp160 (qui dénote un début de séroconversion). Là encore, si le test est douteux ou dénote un début de séroconversion, un second test de confirmation est réalisé trois semaines plus tard, le temps d'attendre que la séroconversion soit complète. A la suite de ce test, trois cas se présentent :
- confirmation de la séroconversion au VIH-1
- séropositivité au VIH-2 (qui doit être à nouveau confirmé par un test spécifique au VIH-2)
- réaction non liée au VIH.
Ce n'est qu'à la suite de l'ensemble des ces tests qu'un médecin pourra déclarer un patient séropositif.
[modifier] Tests pratiqués sur des enfants nés de mères séropositives
L'isolement en culture° est généralement utilisé pour les nouveau-nés de mères séropositives, car ces derniers sont de faits séropositifs (sans forcément être infectés par le VIH) : les anticorps de la mère ayant été transmis. L'infection est confirmée lorsqu'une activité de transcriptase inverse est détectée ou bien des antigènes p24. La détection de l'ARN virale est aussi pratiquée, on cherche les gènes gag ou pol du VIH. Cette méthode tend à remplacer la méthode d'isolement par culture pour les nouveau-nés.
[modifier] Techniques
[modifier] ELISA
Article détaillé : Enzyme-linked immunosorbent assay.Les tests sanguins du VIH de type ELISA sont les plus couramment utilisés dans le cadre du dépistage — screening en anglais. Ces tests sont choisis pour leur importante sensibilité. En pratique cela évite de passer à coté d'un cas infecté en le déclarant faussement sain — cas d'un faux négatif. C'est ainsi qu'un test ELISA suffit dans le dépistage de poches sanguines dans le cadre de transfusion (dons du sang). En vue d'un diagnostic sérologique d'un patient, ce test doit être confirmé par un test de confirmation, n'étant pas excepte de faux positif. Cependant, suite à la généralisation du dépistage notamment en Europe (Dépistage anonyme et gratuit en France), il fut constaté que certains patients refusaient de venir chercher les résultats de ces tests de confirmation préférant laisser le doute sur le statut sérologique ; aujourd'hui on procède normalement à deux test de type ELISA, le cas de faux positifs étant alors très fortement diminué. Dans tous les cas on procède toujours à des tests complémentaires.
[modifier] Western Blot
Article détaillé : Western blot.[modifier] Tests rapides
Article détaillé : Tests médicaux rapides.[modifier] Antigène p24
Principe : dans le cas d'une recherche d'antigène, on utilise un anticorps primaire qui le reconnaît, puis on utilise un anticorps secondaire, qui reconnaît l'anticorps primaire. L'anticorps secondaire étant couplé à une enzyme qui va réagir avec son substrat, cela produit une coloration mesurée par la densité optique. A noter : comme plusieurs anticorps secondaires se fixent en même temps sur l'anticorps primaire on a une amplification du signal.
[modifier] Quantification de l'ARN plasmatique (Charge virale)
La charge virale désigne la quantification de l'ARN plasmatique du VIH, réalisée par RT-PCR. Celle-ci est exprimée en nombre de copies/ml[8] et en Log (base 10). Il existe, comme dans tout système de quantification biologique, un seuil en dessous duquel la RT-PCR ne peut quantifier le virus, on dit alors que la charge viral est indétectable. Ce seuil est de 50 copies/ml (éventuellement 40 copies/ml pour certains tests récents). En dessous de ce seuil, l'indétectabilité ne signifie en aucun cas que le virus n'est pas présent dans l'organisme — et qu'il n'est pas infecté — mais juste qu'il est présent en quantité infime.
La quantification de l'ARN plasmatique du VIH est, avec la quantification des lymphocytes T4 ou CD4, le principal examen du suivi infectieux du patient. Par ailleurs, dans la progression normale du VIH constatée chez la plupart des patients, la charge virale augmente dès la contamination avant de régresser. Une charge virale est généralement détectable au bout des 15 premiers jours suivant la contamination et ce durant la période fenêtre. Ce test peut rentrer dans le cadre du diagnostic et peut être pratiqué dans certain cas pour une détection précoce d'une séroposivité. Si une valeur positive est significative, une charge virale indétectable n'est absolument pas significative.
[modifier] Quantification de l'ADN du VIH
Contrairement à la quantification de l'ARN plasmatique donc des virus en circulation dans le sang, la Quantification de l'ADN du VIH permet de rechercher le génome viral ou pro-viral intégrés sous forme d'ADN dans les cellules infectées. La recherche de l'ADN du VIH est aujourd'hui utilisée en recherche pour diagnostiquer de façon précoce les nouveau-nés de mères infectées.
[modifier] Culture virale
[modifier] Autres tests
[modifier] Condition de réalisation
[modifier] Ethique
[modifier] Lieux de dépistage
En France :
- Dans les Centres de dépistage anonyme et gratuit CDAG.
- Dans les laboratoires de ville. Le test est remboursé à 100 % sur prescription médicale.
[modifier] Interprétation
[modifier] Fiabilité des tests
[modifier] Notes et références de l'article
- ↑ (en) Negative HIV antibody test results among individuals treated with antiretroviral therapy (ART) during acute/early infection.
- ↑ Cas particulier d'une co-infection VIH-VHC du sujet source
- ↑ Note d'information DGS/DH/DRT n° 666 du 28 octobre 1996
- ↑ (en) Ridzon R, Gallagher K, Ciesielski C, et al. Simultaneous transmission of human immunodeficiency virus and hepatitis C virus from a needle-stick injury. N Engl J Med 1997;336:919-22.
- ↑ (en) HIV Seroconversion in HEALTH-CARE WORKERS
- ↑ (en) J.L. Gerberding, San Francisco General Hospital, unpublished data, May 1997
- ↑ (fr) Les rétrovirus, dans la section Le diagnostique biologique - L'apparition des anticorps demande un certain temps..., page 16
- ↑ Attention, une autre unité existe non équivalente : UI/ml.
