Blot (biologie)

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En biologie moléculaire et en génétique, le blot terme anglophone dont l'équivalent français est buvardage, est une méthode de transfert de protéines, d'ADN ou d'ARN, sur un support (par exemple, une membrane de nitrocellulose ou une membrane en nylon). Dans beaucoup de cas, ceci est fait après une électrophorèse, transférant les molécules à partir du gel sur la membrane, ou d'autres fois ajoutant les échantillons directement sur la membrane.

Après fixation, les protéines, l'ADN ou l'ARN transférés sont alors visualisés par une ou plusieurs différentes méthodes :

  • Visualisation autoradiographique des molécules marquées radioactivement
  • Par coloration (par exemple, au bromure d'argent pour les protéines)
  • Par marquage spécifique de quelques protéines ou acides nucléiques. Celui-ci se fait avec des anticorps ou sondes qui vont se lier uniquement à quelques molécules du blot. Sur ces anticorps va être fixée une enzyme, après le lavage, et ajout du réactif approprié, l'activité enzymatique est visualisée (et ainsi, les molécules que nous recherchons dans le blot). La réaction enzymatique va se traduire par l'apparition d'un tâche colorée ou d'une réaction chimiluminiscente enregistrée par un film photographique.

Les méthodes communes du buvardage sont :

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